caa a22 4500 378896024 CHVBK 20180305123506.0 cr unu---uuuuu 161128e20041201xx s 000 0 eng 10.1515/BC.2004.152 doi (NATIONALLICENCE)gruyter-10.1515/BC.2004.152 Stereospecificity of horseradish peroxidase [Elektronische Daten] [M. Ángeles Gilabert, Lorena G. Fenoll, Francisco García-Molina, Pedro A. García-Ruiz, José Tudela, Francisco García-Cánovas, José N. Rodríguez-López] We report here on the stereospecificity observed in the action of horseradish peroxidase (HRPC) on monophenol and diphenol substrates. Several enantiomers of monophenols and o-diphenols were assayed: L-tyrosinol, D-tyrosinol, L-tyrosine, DL-tyrosine, D-tyrosine, L-dopa, DL-dopa, D-dopa, L-α-methyldopa, DL-α-methyldopa, DL-adrenaline, D-adrenaline, L-isoproterenol, DL-isoproterenol and D-isoproterenol. The electronic density at the carbon atoms in the C-1 and C-2 positions of the benzene ring were determined by NMR assays (δ1 and δ2). This value is related to the nucleophilic power of the oxygen atom of the hydroxyl groups and to its oxidation-reduction capacity. The spatial orientation of the ring substituents resulted in lower K m values for L- than for D-isomers. The k cat values for substrates capable of saturating the enzyme were lower for D- than for L-isomers, although both have the same δ1 and δ2 NMR values for carbons C-1 and C-2, and therefore the same oxidation-reduction potential. In the case of substrates that cannot saturate the enzyme, the values of the binding constant for compound II (an intermediate in the catalytic cycle) followed the order: L-isomer>DL-isomer>D-isomer. Therefore, horseradish peroxidase showed stereospecificity in its affinity toward its substrates (K m) and in their transformation reaction rates (k cat). ©2004 by Walter de Gruyter Berlin New York Biochemistry nationallicence Molecular biology nationallicence Cellular biology nationallicence ascorbic acid nationallicence free radicals nationallicence isomers nationallicence peroxidase nationallicence phenols nationallicence steady-state kinetics nationallicence Gilabert M. Ángeles Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut Fenoll Lorena G. Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut García-Molina Francisco Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut García-Ruiz Pedro A. Departamento de Química Orgánica, Facultad de Química, Universidad de Murcia, E-30080, Murcia, Spain aut Tudela José Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut García-Cánovas Francisco Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut Rodríguez-López José N. Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut Biological Chemistry Walter de Gruyter 385/12(2004-12-01), 1177-1184 1431-6730 385:12<1177 2004 385 bchm https://doi.org/10.1515/BC.2004.152 text/html Onlinezugriff via DOI 1 research article jats NATIONALLICENCE 856 40 https://doi.org/10.1515/BC.2004.152 text/html Onlinezugriff via DOI NATIONALLICENCE 700 1- Gilabert M. Ángeles Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut NATIONALLICENCE 700 1- Fenoll Lorena G. Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut NATIONALLICENCE 700 1- García-Molina Francisco Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut NATIONALLICENCE 700 1- García-Ruiz Pedro A. Departamento de Química Orgánica, Facultad de Química, Universidad de Murcia, E-30080, Murcia, Spain aut NATIONALLICENCE 700 1- Tudela José Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut NATIONALLICENCE 700 1- García-Cánovas Francisco Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut NATIONALLICENCE 700 1- Rodríguez-López José N. Grupo de Investigación de Enzimología (GENZ), Departamento de Bioquímica y Biología Molecular-A, Facultad de Biología, Universidad de Murcia, A. Correos 4021, E-30080, Murcia, Spain aut NATIONALLICENCE 773 0- Biological Chemistry Walter de Gruyter 385/12(2004-12-01), 1177-1184 1431-6730 385:12<1177 2004 385 bchm CC0 http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0 nationallicence BK010053 XK010053 XK010000 NATIONALLICENCE NATIONALLICENCE NL-gruyter