caa a22 4500 467900140 CHVBK 20180406152815.0 cr unu---uuuuu 170328e20060901xx s 000 0 eng 10.1007/s00299-006-0159-9 doi (NATIONALLICENCE)springer-10.1007/s00299-006-0159-9 Efficient production of Agrobacterium rhizogenes -transformed roots and composite plants for studying gene expression in coffee roots [Elektronische Daten] [E. Alpizar, E. Dechamp, S. Espeout, M. Royer, A. Lecouls, M. Nicole, B. Bertrand, P. Lashermes, H. Etienne] The possibility of rapid validation and functional analysis of nematode resistance genes is a common objective for numerous species and particularly for woody species. In this aim, we developed an Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation protocol for Coffea arabica enabling efficient and rapid regeneration of transformed roots from the hypocotyls of germinated zygotic embryos, and the subsequent production of composite plants. The A. rhizogenes strain A4RS proved to be the most virulent. High transformation efficiencies (70%) were obtained using a 2-week co-cultivation period at a temperature of 15-18°C. Using a p35S-gusA-int construct inserted in the pBIN19 binary plasmid, we could estimate that 35% of transformed roots were GUS positive (co-transformed). Using the GUS assay as visual marker, 40% composite plants bearing a branched co-transformed rootstock could be obtained after only 12 weeks without selection with herbicides or antibiotics. Transgenic coffee roots obtained with A. rhizogenes did not exhibit the ‘hairy' disturbed phenotype and were morphologically similar to normal roots. PCR analyses demonstrated that all co-transformed roots were positive for the expected rolB and gusA genes. Transformed and non-transformed root systems from both susceptible and resistant varieties were inoculated with Meloidogyne exigua nematode individuals. Inoculation of composite plants from the Caturra susceptible variety resulted in the normal development of nematode larvae. Numbers of extracted nematodes demonstrated that transformed roots retain the resistance/sensibility phenotype of varieties from which they are derived. These results suggest that composite plants constitute a powerful tool for studying nematode resistance genes. Springer-Verlag, 2006 Agrobacterium rhizogenes nationallicence Coffee nationallicence Composite plant nationallicence Genetic transformation nationallicence Nematode nationallicence Alpizar E. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut Dechamp E. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut Espeout S. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut Royer M. CIRAD-Département AMIS, UMR BGPI, Campus international de Baillarguet, 34398, Montpellier, France aut Lecouls A. Institut de Recherche pour le Développement (IRD), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut Nicole M. Institut de Recherche pour le Développement (IRD), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut Bertrand B. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut Lashermes P. Institut de Recherche pour le Développement (IRD), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut Etienne H. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut Plant Cell Reports Springer-Verlag 25/9(2006-09-01), 959-967 0721-7714 25:9<959 2006 25 299 https://doi.org/10.1007/s00299-006-0159-9 text/html Onlinezugriff via DOI 1 research-article jats NATIONALLICENCE 856 40 https://doi.org/10.1007/s00299-006-0159-9 text/html Onlinezugriff via DOI NATIONALLICENCE 700 1- Alpizar E. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Dechamp E. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Espeout S. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Royer M. CIRAD-Département AMIS, UMR BGPI, Campus international de Baillarguet, 34398, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Lecouls A. Institut de Recherche pour le Développement (IRD), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Nicole M. Institut de Recherche pour le Développement (IRD), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Bertrand B. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Lashermes P. Institut de Recherche pour le Développement (IRD), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Etienne H. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développement - Département des Cultures Pérennes (CIRAD-CP), UMR-DGPC, Résistance des Plantes, IRD, 911 Av. de Agropolis, BP 64501, 34394, Montpellier, France aut NATIONALLICENCE 773 0- Plant Cell Reports Springer-Verlag 25/9(2006-09-01), 959-967 0721-7714 25:9<959 2006 25 299 Metadata rights reserved Springer special CC-BY-NC licence nationallicence BK010053 XK010053 XK010000 NATIONALLICENCE NATIONALLICENCE NL-springer