caa a22 4500 475743822 CHVBK 20180406123507.0 cr unu---uuuuu 170329e20000101xx s 000 0 eng 10.1023/A:1007042825783 doi (NATIONALLICENCE)springer-10.1023/A:1007042825783 Isolation and Characterization of a Cysteine Protease from the Latex of Araujia hortorum Fruits [Elektronische Daten] [Nora Priolo, Susana del Valle, M. Arribére, Laura López, Néstor Caffini] A new protease (araujiain h l) was purified to mass spectroscopy homogeneity from the latex of Araujia hortorum Fourn. (Asclepiadaceae) fruits by ultracentrifugation and ion exchange chromatography. The enzyme has a molecular mass of 24,031 (mass spectrometry) and an isoelectric point higher than 9.3. The optimum pH range for casein hydrolysis was 8.0-9.5. The enzyme showed remarkable caseinolytic activity at high temperatures, although its thermal stability decayed rapidly. The proteinase was activated by thiol compounds and inhibited by common thiol-blocking reagents, particularly E-64 and HgCl2, suggesting the enzyme belongs to the cysteine protease family. The concentration of active sites as determined by titration with E-64 was 3.3 μM. When assayed on N-α-CBZ-amino acid-p-nitrophenyl esters, the enzyme showed higher preference for the glutamine derivative, followed by those of alanine, asparagine, glycine, and leucine, in decreasing order. Partial homology (36-48%) with other plant cysteine proteinases was observed in an internal fragment obtained by Protease V8 treatment. Plenum Publishing Corporation, 2000 Araujia hortorum nationallicence Asclepiadaceae nationallicence latex nationallicence milkweed nationallicence plant proteases nationallicence Priolo Nora Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut del Valle Susana Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut Arribére M. Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut López Laura Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut Caffini Néstor Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut Journal of Protein Chemistry Kluwer Academic Publishers-Plenum Publishers 19/1(2000-01-01), 39-49 0277-8033 19:1<39 2000 19 10930 https://doi.org/10.1023/A:1007042825783 text/html Onlinezugriff via DOI 1 research-article jats NATIONALLICENCE 856 40 https://doi.org/10.1023/A:1007042825783 text/html Onlinezugriff via DOI NATIONALLICENCE 700 1- Priolo Nora Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut NATIONALLICENCE 700 1- del Valle Susana Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut NATIONALLICENCE 700 1- Arribére M. Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut NATIONALLICENCE 700 1- López Laura Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut NATIONALLICENCE 700 1- Caffini Néstor Laboratorio de Investigación de Proteínas Vegetales (LIPROVE), Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas, Universidad Nacional de La Plata, C.C. 711, 1900, La Plata, Argentina aut NATIONALLICENCE 773 0- Journal of Protein Chemistry Kluwer Academic Publishers-Plenum Publishers 19/1(2000-01-01), 39-49 0277-8033 19:1<39 2000 19 10930 Metadata rights reserved Springer special CC-BY-NC licence nationallicence BK010053 XK010053 XK010000 NATIONALLICENCE NATIONALLICENCE NL-springer