caa a22 4500 475774965 CHVBK 20180406123628.0 cr unu---uuuuu 170329e20000201xx s 000 0 eng 10.1007/s004180050017 doi (NATIONALLICENCE)springer-10.1007/s004180050017 A versatile chondrogenic rat calvaria cell line R-tTA-24 that permits tetracycline-regulated gene expression [Elektronische Daten] [C. Bergwitz, T. Wendlandt, E. Pötter, I. Glomb, K. Gras, A. von zur Mühlen, G. Brabant] Abstract : The clonal rat calvaria cell line RCJ3.1C5.18 (RCJ) undergoes chondrogenic differentiation after long-term culture post confluence. To allow flexible genetic manipulation, a tetracycline-regulated gene expression system was established in this cell line. Treatment with tetracycline in operational doses does not affect the differentiation of RCJ cells with respect to the markers tested. After stable transfection with pUHD15.1 containing the tetracycline transactivator (tTA) in the presence of pTK-hyg for hygromycin selection, 28 clones were isolated and characterized for alcian blue staining of cartilage-specific proteoglycans and for collagen type II expression. Clone R-tTA-24 was selected on the basis of phenotype and displayed tetracycline-dependent downregulation of luciferase activity (tet-OFF system) by two orders of magnitude (57-149-fold) after stable transfection with the reporter gene pBI-EGFP/luc. The novel, chondrogenic cell line R-tTA-24 may be stably transfected with various genes of interest for tetracycline- regulated gene expression using neomycin selection and may be a valuable tool to study the process of chondrogenic differentiation in vitro. Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 2000 Bergwitz C. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut Wendlandt T. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut Pötter E. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut Glomb I. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut Gras K. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut von zur Mühlen A. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut Brabant G. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut https://doi.org/10.1007/s004180050017 text/html Onlinezugriff via DOI 1 research-article jats NATIONALLICENCE 856 40 https://doi.org/10.1007/s004180050017 text/html Onlinezugriff via DOI NATIONALLICENCE 700 1- Bergwitz C. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut NATIONALLICENCE 700 1- Wendlandt T. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut NATIONALLICENCE 700 1- Pötter E. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut NATIONALLICENCE 700 1- Glomb I. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut NATIONALLICENCE 700 1- Gras K. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut NATIONALLICENCE 700 1- von zur Mühlen A. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut NATIONALLICENCE 700 1- Brabant G. Abt. für Klinische Endokrinologie, Medizinische Hochschule Hannover, Carl-Neuberg-Strasse 1, 30625 Hannover, Germany, DE aut Metadata rights reserved Springer special CC-BY-NC licence nationallicence BK010053 XK010053 XK010000 NATIONALLICENCE NATIONALLICENCE NL-springer