caa a22 4500 606176837 CHVBK 20210128100749.0 cr unu---uuuuu 210128e20150301xx s 000 0 eng 10.1007/s00018-014-1733-x doi (NATIONALLICENCE)springer-10.1007/s00018-014-1733-x Proteolytic control of TGF-β co-receptor activity by BMP-1/tolloid-like proteases revealed by quantitative iTRAQ proteomics [Elektronische Daten] [Frédéric Delolme, Cyril Anastasi, Lindsay Alcaraz, Valentin Mendoza, Sandrine Vadon-Le Goff, Maya Talantikite, Robin Capomaccio, Jimmy Mevaere, Laëtitia Fortin, Dominique Mazzocut, Odile Damour, Isabelle Zanella-Cléon, David Hulmes, Christopher Overall, Ulrich Valcourt, Fernando Lopez-Casillas, Catherine Moali] The metalloproteinase BMP-1 (bone morphogenetic protein-1) plays a major role in the control of extracellular matrix (ECM) assembly and growth factor activation. Most of the growth factors activated by BMP-1 are members of the TGF-β superfamily known to regulate multiple biological processes including embryonic development, wound healing, inflammation and tumor progression. In this study, we used an iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantification)-based quantitative proteomic approach to reveal the release of proteolytic fragments from the cell surface or the ECM by BMP-1. Thirty-eight extracellular proteins were found in significantly higher or lower amounts in the conditioned medium of HT1080 cells overexpressing BMP-1 and thus, could be considered as candidate substrates. Strikingly, three of these new candidates (betaglycan, CD109 and neuropilin-1) were TGF-β co-receptors, also acting as antagonists when released from the cell surface, and were chosen for further substrate validation. Betaglycan and CD109 proved to be directly cleaved by BMP-1 and the corresponding cleavage sites were extensively characterized using a new mass spectrometry approach. Furthermore, we could show that the ability of betaglycan and CD109 to interact with TGF-β was altered after cleavage by BMP-1, leading to increased and prolonged SMAD2 phosphorylation in BMP-1-overexpressing cells. Betaglycan processing was also observed in primary corneal keratocytes, indicating a general and novel mechanism by which BMP-1 directly affects signaling by controlling TGF-β co-receptor activity. The proteomic data have been submitted to ProteomeXchange with the identifier PXD000786 and doi: 10.6019/PXD000786 . Springer Basel, 2014 BMP-1/tolloid-like proteinases nationallicence Mass spectrometry nationallicence Degradomics nationallicence Surface plasmon resonance nationallicence Zona pellucida nationallicence Glycosaminoglycan nationallicence BG : Betaglycan nationallicence BMP : Bone Morphogenetic Protein nationallicence BSA : Bovine Serum Albumin nationallicence BTP : BMP-1/Tolloid-like Proteinase nationallicence DTT : Dithiothreitol nationallicence ECM : Extracellular Matrix nationallicence GAG : Glycosaminoglycan nationallicence mTLD : Mammalian Tolloid nationallicence mTLL-1 : Mammalian Tolloid-like 1 nationallicence SDS-PAGE : Sodium Dodecyl Sulfate Poly-Acrylamide Gel Electrophoresis nationallicence TGF-β : Transforming Growth Factor-β nationallicence ZP : Zona Pellucida nationallicence Delolme Frédéric UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Anastasi Cyril UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Alcaraz Lindsay INSERM U1052, CNRS UMR 5286, Centre de Recherche en Cancérologie de Lyon (CRCL), Université de Lyon, Centre Léon Bérard, 69373, Lyon, France aut Mendoza Valentin Instituto de Fisiologia Celular, Universidad Nacional Autonoma de Mexico, 04510, Mexico, Mexico aut Vadon-Le Goff Sandrine UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Talantikite Maya UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Capomaccio Robin UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Mevaere Jimmy UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Fortin Laëtitia UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Mazzocut Dominique Centre Commun de Microanalyse des Protéines, UMS 3444, Institut de Biologie et Chimie des Protéines, 69367, Lyon, France aut Damour Odile UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Zanella-Cléon Isabelle Centre Commun de Microanalyse des Protéines, UMS 3444, Institut de Biologie et Chimie des Protéines, 69367, Lyon, France aut Hulmes David UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Overall Christopher Centre for Blood Research, University of British Columbia, V6T 1Z3, Vancouver, BC, Canada aut Valcourt Ulrich INSERM U1052, CNRS UMR 5286, Centre de Recherche en Cancérologie de Lyon (CRCL), Université de Lyon, Centre Léon Bérard, 69373, Lyon, France aut Lopez-Casillas Fernando Instituto de Fisiologia Celular, Universidad Nacional Autonoma de Mexico, 04510, Mexico, Mexico aut Moali Catherine UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut Cellular and Molecular Life Sciences Springer Basel 72/5(2015-03-01), 1009-1027 1420-682X 72:5<1009 2015 72 18 https://doi.org/10.1007/s00018-014-1733-x text/html Onlinezugriff via DOI BK010053 XK010053 XK010000 Metadata rights reserved Springer special CC-BY-NC licence nationallicence 1 research-article jats NATIONALLICENCE NATIONALLICENCE NL-springer NATIONALLICENCE 856 40 https://doi.org/10.1007/s00018-014-1733-x text/html Onlinezugriff via DOI NATIONALLICENCE 700 1- Delolme Frédéric UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Anastasi Cyril UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Alcaraz Lindsay INSERM U1052, CNRS UMR 5286, Centre de Recherche en Cancérologie de Lyon (CRCL), Université de Lyon, Centre Léon Bérard, 69373, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Mendoza Valentin Instituto de Fisiologia Celular, Universidad Nacional Autonoma de Mexico, 04510, Mexico, Mexico aut NATIONALLICENCE 700 1- Vadon-Le Goff Sandrine UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Talantikite Maya UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Capomaccio Robin UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Mevaere Jimmy UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Fortin Laëtitia UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Mazzocut Dominique Centre Commun de Microanalyse des Protéines, UMS 3444, Institut de Biologie et Chimie des Protéines, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Damour Odile UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Zanella-Cléon Isabelle Centre Commun de Microanalyse des Protéines, UMS 3444, Institut de Biologie et Chimie des Protéines, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Hulmes David UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Overall Christopher Centre for Blood Research, University of British Columbia, V6T 1Z3, Vancouver, BC, Canada aut NATIONALLICENCE 700 1- Valcourt Ulrich INSERM U1052, CNRS UMR 5286, Centre de Recherche en Cancérologie de Lyon (CRCL), Université de Lyon, Centre Léon Bérard, 69373, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 700 1- Lopez-Casillas Fernando Instituto de Fisiologia Celular, Universidad Nacional Autonoma de Mexico, 04510, Mexico, Mexico aut NATIONALLICENCE 700 1- Moali Catherine UMR 5305, Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique, CNRS/Université de Lyon, 69367, Lyon, France aut NATIONALLICENCE 773 0- Cellular and Molecular Life Sciences Springer Basel 72/5(2015-03-01), 1009-1027 1420-682X 72:5<1009 2015 72 18