caa a22 4500 606234489 CHVBK 20210128101237.0 cr unu---uuuuu 210128e20150701xx s 000 0 eng 10.1007/s11010-015-2416-0 doi (NATIONALLICENCE)springer-10.1007/s11010-015-2416-0 Hyperglycemia promotes p53-Mdm2 interaction but reduces p53 ubiquitination in RINm5F cells [Elektronische Daten] [Barzalobre-Gerónimo Raúl, Flores-López Antonio, Baiza-Gutman Arturo, Cruz Miguel, García-Macedo Rebeca, Ávalos-Rodríguez Alejandro, Contreras-Ramos Alejandra, Díaz-Flores Margarita, Ortega-Camarillo Clara] The apoptosis of β cells induced by hyperglycemia has been associated with p53 mobilization to mitochondria and p53 phosphorylation. Murine double minute 2 (Mdm2) induces the degradation of p53 and thereby protects cells from apoptosis. We studied the effect of glucose at high concentration on the ability of Mdm2 to ubiquitinate p53 and promote its degradation. RINm5F cells were grown in RPMI-1640 medium with 5 or 30mM glucose for varying periods of time. After this treatment, the expression of Mdm2 was measured using real-time PCR. The phosphorylation of Mdm2 at Ser166, p53 at Ser15, and the kinases Akt and ATM were measured by Western blotting. The formation of the p53-Mdm2 complex and p53 ubiquitination was assessed by p53 immunoprecipitation and immunofluorescence. Our results showed that high glucose reduced Mdm2 mRNA expression and protein concentration and increased Mdm2 and Akt phosphorylation, albeit with slower kinetics for Akt. It also promoted p53-Mdm2 complex formation, whereas p53 ubiquitination was suppressed. Furthermore, phosphorylation of both p53 Ser15 and ATM was increased in the presence of 30mM glucose. These data indicate that high concentration glucose decrease the mRNA expression and cytosolic concentration of Mdm2. However, although the increase in glucose promoted the phosphorylation of Mdm2, it also decreased p53 ubiquitination, thus avoiding p53 degradation. In hyperglycemic conditions, such as diabetes mellitus, the reduction of pancreatic β cells mass is favored by stabilization of p53 in association with low p53 ubiquitination and reduced expression of Mdm2. Springer Science+Business Media New York, 2015 Mdm2 nationallicence p53 nationallicence Beta cells nationallicence Ubiquitin nationallicence pMdm2 Ser166 nationallicence Hyperglycemia nationallicence Raúl Barzalobre-Gerónimo Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut Antonio Flores-López Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut Arturo Baiza-Gutman Laboratorio en Biología del Desarrollo. Unidad de Morfología FES-Iztacala, UNAM, Av. de los Barrios 1, Los Reyes Iztacala, C.P. 54090, Tlanepantla, Edo. de México, Mexico aut Miguel Cruz Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut Rebeca García-Macedo Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut Alejandro Ávalos-Rodríguez Bioquímica de la Reproducción, Depto. Prod. Agrícola y Animal, Universidad Autónoma Metropolitana-Xoch, Calz del Hueso 1100, Col. Villa Quietud, Del. Coyoacán, C.P. 04960, México, DF, México aut Alejandra Contreras-Ramos Lab. de Biología del Desarrollo y T. Exp, Hospital Infantil de Mexico Federico Gomez, Dr. Marquez 162, Col Doctores Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, México, DF, México aut Margarita Díaz-Flores Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut Clara Ortega-Camarillo Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut Molecular and Cellular Biochemistry Springer US; http://www.springer-ny.com 405/1-2(2015-07-01), 257-264 0300-8177 405:1-2<257 2015 405 11010 https://doi.org/10.1007/s11010-015-2416-0 text/html Onlinezugriff via DOI BK010053 XK010053 XK010000 Metadata rights reserved Springer special CC-BY-NC licence nationallicence 1 research-article jats NATIONALLICENCE NATIONALLICENCE NL-springer NATIONALLICENCE 856 40 https://doi.org/10.1007/s11010-015-2416-0 text/html Onlinezugriff via DOI NATIONALLICENCE 700 1- Raúl Barzalobre-Gerónimo Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut NATIONALLICENCE 700 1- Antonio Flores-López Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut NATIONALLICENCE 700 1- Arturo Baiza-Gutman Laboratorio en Biología del Desarrollo. Unidad de Morfología FES-Iztacala, UNAM, Av. de los Barrios 1, Los Reyes Iztacala, C.P. 54090, Tlanepantla, Edo. de México, Mexico aut NATIONALLICENCE 700 1- Miguel Cruz Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut NATIONALLICENCE 700 1- Rebeca García-Macedo Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut NATIONALLICENCE 700 1- Alejandro Ávalos-Rodríguez Bioquímica de la Reproducción, Depto. Prod. Agrícola y Animal, Universidad Autónoma Metropolitana-Xoch, Calz del Hueso 1100, Col. Villa Quietud, Del. Coyoacán, C.P. 04960, México, DF, México aut NATIONALLICENCE 700 1- Alejandra Contreras-Ramos Lab. de Biología del Desarrollo y T. Exp, Hospital Infantil de Mexico Federico Gomez, Dr. Marquez 162, Col Doctores Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, México, DF, México aut NATIONALLICENCE 700 1- Margarita Díaz-Flores Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut NATIONALLICENCE 700 1- Clara Ortega-Camarillo Unidad de Investigación Médica en Bioquímica, HE, Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS, Av Cuauhtémoc 330, Col Doctores, Del. Cuauhtémoc, C.P. 06720, Mexico, DF, Mexico aut NATIONALLICENCE 773 0- Molecular and Cellular Biochemistry Springer US; http://www.springer-ny.com 405/1-2(2015-07-01), 257-264 0300-8177 405:1-2<257 2015 405 11010